技�(shù)知識
�(xì)胞破碎方法有哪些?
文章出處�原創(chuàng)
作者:洛尚中國(Lawson�
人氣: 574
�(fā)表時�:2016/12/11 13:29:11
液體剪切壓力�
通過將樣品從高壓腔轉(zhuǎn)入到低壓腔時�(chǎn)生的快速壓力落差來破碎�(xì)�
�(yōu)點:破碎快速有�,適合大體積細(xì)胞破�
缺點:可�(dǎo)致樣品溫度升高(操作時需要冷卻系�(tǒng)�
超聲
通過高頻率的超聲波破碎細(xì)胞粉�
�(yōu)點:操作簡單
缺點:可�(dǎo)致樣品溫度升�,其很難通過冷卻系統(tǒng)降溫,剪切力有可能�(dǎo)致蛋白質(zhì)受損,噪音較大,破碎量較�
玻璃珠磨�
用玻璃珠的攪動來磨碎�(xì)�
�(yōu)點:對于很難破碎的細(xì)胞(如酵母)非常有用
缺點:有些慢且有噪音
滲透壓
從高滲透壓�(zhuǎn)向低滲透壓介質(zhì)
�(yōu)點:操作簡便,花費低廉
缺點:僅用于外壁較脆弱的�(xì)胞(如動物細(xì)胞)
反復(fù)凍融
通過反復(fù)形成冰晶破碎�(xì)胞;通常�(jié)合酶法裂解下�(xì)�
�(yōu)點:操作簡便,花費低廉,�(chǎn)生大量細(xì)胞膜碎片
缺點:慢,也許會損傷敏感蛋白質(zhì)或者破壞蛋白質(zhì)和細(xì)胞膜的相互作�,�(chǎn)量低
酶法裂解
常和其他技�(shù)一同使�,如反�(fù)凍融或滲透壓破碎法;溶菌酶是破碎�(xì)菌細(xì)胞壁最常用的酶
�(yōu)點:溫和,可產(chǎn)生較大的�(xì)胞膜碎片
缺點:慢,�(chǎn)量低